摘要:目的:观察电针干预对帕金森病痴呆(PDD)模型小鼠海马CA1区突触素(SYN)、突触后密度蛋白95(PSD-95)、离子钙结合接头分子1(Iba-1)+CD68+CD68+小胶质细胞数及补体(C)相关蛋白表达的影响,探讨“嗅三针”改善PDD记忆障碍的部分作用机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和电针组,每组10只。采用单侧内侧前脑束注射6-羟多巴胺建立PDD小鼠模型。电针组予“嗅三针”电针干预,每日1次,每次20 min,连续14 d。采用Morris水迷宫及新物体识别实验评估各组小鼠学习记忆能力;Western blot法检测海马CA1区SYN、PSD-95蛋白的表达量;免疫荧光法标记海马CA1区Iba-1+小胶质细胞数及补体(C)相关蛋白表达的影响,探讨“嗅三针”改善PDD记忆障碍的部分作用机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和电针组,每组10只。采用单侧内侧前脑束注射6-羟多巴胺建立PDD小鼠模型。电针组予“嗅三针”电针干预,每日1次,每次20 min,连续14 d。采用Morris水迷宫及新物体识别实验评估各组小鼠学习记忆能力;Western blot法检测海马CA1区SYN、PSD-95蛋白的表达量;免疫荧光法标记海马CA1区Iba-1+CD68+CD68+小胶质细胞及C1q阳性细胞并计算阳性细胞率;ELISA法检测海马CA1区C3蛋白含量。结果:与空白组比较,假手术组各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越原平台次数、新物体识别认知指数(NORI)降低(P<0.01);与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越原平台次数、NORI升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组小鼠海马CA1区SYN、PSD-95蛋白表达量显著降低(P<0.01),Iba-1+小胶质细胞及C1q阳性细胞并计算阳性细胞率;ELISA法检测海马CA1区C3蛋白含量。结果:与空白组比较,假手术组各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越原平台次数、新物体识别认知指数(NORI)降低(P<0.01);与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越原平台次数、NORI升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组小鼠海马CA1区SYN、PSD-95蛋白表达量显著降低(P<0.01),Iba-1+CD68+CD68+小胶质细胞率、C1q阳性细胞率及C3蛋白含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,电针组小鼠海马CA1区SYN、PSD-95蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.05),Iba-1+小胶质细胞率、C1q阳性细胞率及C3蛋白含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,电针组小鼠海马CA1区SYN、PSD-95蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.05),Iba-1+CD68+CD68+小胶质细胞率、C1q阳性细胞率及C3蛋白含量显著降低(P<0.01)。结论:“嗅三针”可缓解PDD模型小鼠学习记忆障碍,改善海马CA1区突触可塑性,其机制可能与减少海马CA1区C1q、C3表达,降低小胶质细胞吞噬能力有关。Objective To observe the effect of electroacupuncture(EA) of “Xiusanzhen” [bilateral “Yingxiang”(LI20)+“Yintang”(GV24+小胶质细胞率、C1q阳性细胞率及C3蛋白含量显著降低(P<0.01)。结论:“嗅三针”可缓解PDD模型小鼠学习记忆障碍,改善海马CA1区突触可塑性,其机制可能与减少海马CA1区C1q、C3表达,降低小胶质细胞吞噬能力有关。
摘要:目的:观察电针“足三里”“三阴交”“梁门”对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血糖、胃排空及胃窦部Cajal间质细胞(ICC)自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨电针改善DGP胃肠动力功能障碍的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组,每组9只。采用腹腔注射链脲佐菌素结合高脂高糖饲料喂养制备DGP大鼠模型。电针组予单侧“足三里”“三阴交”“梁门”电针治疗,每日1次;3-MA组予3-甲基腺嘌呤(3-MA)腹腔注射,浓度为10 mg/mL,剂量为30 mg·kg(-1)·d(-1)·d(-1);3-MA+电针组予3-MA腹腔注射联合电针治疗;每个疗程5 d,共治疗3个疗程。评定大鼠症状积分,测量血糖;酚红灌胃法检测大鼠胃排空率;Western blot法检测胃窦部ICC中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR的蛋白表达水平;透射电镜观察胃窦部ICC内自噬体数量。结果:造模后,与空白组比较,模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组症状积分及血糖水平均升高(P<0.01)。治疗后,与空白组比较,模型组症状积分、血糖水平仍升高(P<0.01),胃排空率降低(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达降低(P<0.05),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,电针组和3-MA+电针组症状积分、血糖水平均降低(P<0.01),胃排空率升高(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达升高(P<0.01),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),3-MA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及Ⅲ型PI3K、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与3-MA组比较,电针组、3-MA+电针组症状积分、血糖水平均降低(P<0.01),胃排空率升高(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达升高(P<0.01),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达均降低(P<0.01,P<0.05);与电针组比较,3-MA+电针组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达降低(P<0.01),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达均升高(P<0.01)。透射电镜结果显示,模型组、3-MA组大鼠胃窦部ICC细胞内受损较重,未见明显自噬结构;电针组、3-MA+电针组胃窦部ICC细胞内自噬小体数量明显增多,ICC受损状况有所改善。结论:电针可能通过调控PI3K/Akt/mTOR通路调节胃窦部ICC自噬水平,从而改善DGP胃肠动力功能障碍。Objective To observe the effect of electroacupuncture(EA) of “Zusanli”(ST36), “Sanyinjiao”(SP6) and “Liangmen”(ST21) on gastrointestinal motility, blood glucose content and expression of autophagy-related proteins 1 light chain 3(LC3), p62, phosphatidyli-nositol-3 kinase(PI3 K), protein kinase B(Akt), p-Akt and mammalian target protein of rapamycin(mTOR) of interstitial cells of Cajal(ICCs) in the cultured gastric antrum cells in diabetic gastroparesis(DGP) rats, so as to reveal its mechanisms underlying improvement of DGP. Methods A total of 45 Sprague Dawley(SD) rats were randomly divided into blank control, model, EA, medication(3-methyladenine, 3-MA) and EA+3-MA groups, with 9 rats in each group. The DGP model was established by intraperitoneal injection of 2% streptozotocin(STZ) combined with high-fat and high sugar diet for 8 weeks. The gastric emptying rate was measured by using gavage of phenol red(to measure the propelling length of the phenol red/total length of small intestine ×100%). The symptom score(mental state, coat color and luster, behavior and activity, stool traits) of rats was observed every week and the blood glucose content was measured by using a glucometer. EA(20 Hz/100 Hz, 2 mA) was applied to unilateral ST36, SP6 and ST21 alternatively for 15 min, once daily, 5 days a week for 3 weeks. Rats of the 3-MA and 3-MA+EA groups received intraperitoneal injection of 3-MA(30 mg·kg(-1);3-MA+电针组予3-MA腹腔注射联合电针治疗;每个疗程5 d,共治疗3个疗程。评定大鼠症状积分,测量血糖;酚红灌胃法检测大鼠胃排空率;Western blot法检测胃窦部ICC中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR的蛋白表达水平;透射电镜观察胃窦部ICC内自噬体数量。结果:造模后,与空白组比较,模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组症状积分及血糖水平均升高(P<0.01)。治疗后,与空白组比较,模型组症状积分、血糖水平仍升高(P<0.01),胃排空率降低(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达降低(P<0.05),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,电针组和3-MA+电针组症状积分、血糖水平均降低(P<0.01),胃排空率升高(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达升高(P<0.01),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),3-MA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及Ⅲ型PI3K、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);与3-MA组比较,电针组、3-MA+电针组症状积分、血糖水平均降低(P<0.01),胃排空率升高(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达升高(P<0.01),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达均降低(P<0.01,P<0.05);与电针组比较,3-MA+电针组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Ⅲ型PI3K蛋白表达降低(P<0.01),p62、Ⅰ型PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白表达均升高(P<0.01)。透射电镜结果显示,模型组、3-MA组大鼠胃窦部ICC细胞内受损较重,未见明显自噬结构;电针组、3-MA+电针组胃窦部ICC细胞内自噬小体数量明显增多,ICC受损状况有所改善。结论:电针可能通过调控PI3K/Akt/mTOR通路调节胃窦部ICC自噬水平,从而改善DGP胃肠动力功能障碍。
摘要:目的:比较中英文针灸动物实验论文文献特征的差异,总结国内外期刊针灸动物实验研究报告内容构成的异同。方法:计算机检索中国学术期刊全文数据库、万方医药期刊数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed数据库、Web of Science数据库中2016年至2018年发表的针灸动物实验文献,根据纳入、排除标准筛选,建立数据库,提取文献题目、作者、刊载期刊、影响因子、作者国家、出版年份、引用频次、基金资助情况、疾病种类、观察指标数量、图表数量等要素信息,初步总结国内外此类文献的差异。结果:共检索到针灸动物实验文献7 515篇,按照纳入、排除标准最终纳入符合研究要求的文献共2 458篇,其中中文文献1 827篇,英文文献631篇。(1)中文文献中《针刺研究》发文量最多,共169篇,占9.25%;刊载期刊影响因子最高的是《针刺研究》,为3.187。英文文献中Evidence-based Complementary and Alternative Medicine发文量最多,共78篇,占12.36%;刊载期刊影响因子最高的是Gastroenterology,为17.373。(2)中文文献第一作者所属国家全部为中国,所属机构中北京中医药大学发文最多,共142篇,占7.77%。英文文献第一作者共涉及16个国家,中国最多,为523篇,占82.88%,其次是韩国、巴西、美国、日本。(3)中文文献篇均被引频次为7.50次,明显高于英文文献篇均被引频次(4.61次)。(4)受基金资助的中、英文文献分别为1 680篇(91.95%)、569篇(90.17%)。(5)从疾病名称及动物模型来看,中、英文文献分别涉及135、220种疾病,前10位的病种中有8种相同,分别是中风相关病症、关节炎、阿尔茨海默病、抑郁症、糖尿病、脊髓损伤、高血压、肥胖。(6)从观察指标项数上来看,中文文献最多为6项,篇均指标数量为2.46;英文文献最多为12项,篇均指标数量为4.02。(7)中文文献图表数量最多的为17个,占比最大的是2—4个,合计1 028篇,共占56.27%;英文文献图表数量最多的为27个,占比最大的是4—6个,合计347篇,占54.99%。结论:针灸动物实验研究方面的中文文献发表数量远多于英文文献,主要作者群体均来自中国,大多数研究有基金资助,中英文文献涉及的病种差异不大,但中文文献篇均被引频次明显高于英文,英文文献的观察指标项数及图表数量明显多于中文文献,表明发表在中文期刊的针灸实验研究受到更多的关注,而发表在英文期刊的针灸实验研究内容更完整深入。